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一、试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。实验用水均为蒸馏水或去离子水。(1)甲苯(2)1%羧甲基纤维素溶液:1g 羧甲基纤维素钠,用50%的乙醇溶至100ml。(3)pH5.5醋酸盐缓冲液:0.2mol/L 醋酸溶液 11.55ml 95% 冰醋酸溶至1L;0.2mol/L 醋酸钠溶液 16.4g C2H3O2Na或27.22g C2H3O2Na·3H2O溶至1L;取11ml 0.2mol/L 醋酸溶液和88ml 0.2mol/L 醋酸钠溶液混匀即成PH 5.5醋酸盐缓冲液。(4)3,5-二硝基水杨酸溶液:称1.25g二硝基水杨酸,溶于50ml 2mol/L NaOH和125ml水中,再加75g酒石酸钾钠,用水稀释至250ml(保存期不过7天)。(5)葡萄糖标准液(1mg/mL)预先将分析纯葡萄糖置80℃烘箱内约12小时。准确称取50mg葡萄糖于烧杯中,用蒸馏水溶解后,移至50mL容量瓶中,定容,摇匀(冰箱中4℃保存期约一星期)。若该溶液发生混浊和出现絮状物现象,则应弃之,重新配制。二、仪器分析天平(0.0001 g)、50ml试管、恒温箱、水浴锅(HH-4)、吸管(10 ml)、三角瓶(50 ml)、小漏斗、量筒(100 ml)、角匙、试管夹、吸耳球、试剂瓶(500ml)、记号笔等。三、葡萄糖标准曲线分别吸1mg/mL的标准葡糖糖溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、...
发布时间: 2022 - 06 - 21
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发布时间: 2021 - 09 - 26
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一般意义上的粗脂肪是指将经前处理的、分散且干燥的样品用乙醚或石油醚等溶剂回流提取,使样品中的脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物。今天我们就来分解一下如何通过残余法检测粗脂肪:一、试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。无水乙醚二、主要仪器万分之一天平、索氏提取器三、试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后,按四分法缩减至100g,粉碎,装入样品瓶备用。四、分析步骤4.1 按规定称取试样(M)(准确至0.0001 g),用滤纸包好,在105 C烘箱中干燥3 h取出,在干燥器中冷却,称重(M1)。4.2 将样包装人索氏脂肪抽提器抽提筒中,再倒人无水乙醚,完全浸泡样包,连接好索氏抽提器各部分,浸泡至少16h。4.3 将浸泡后无水乙醚放入抽提瓶中,在抽提瓶中放人几粒沸石,然后,往抽提瓶中倒入无水乙醚使之完全浸泡样包,连接好仪器各部分,接通冷凝水,在70~80 C水浴上加热,使乙醚回流,控制乙醚回流次数为8次/h,即乙醚回滴速度为120~ 150滴/min,抽提6 h。4.4 抽提完毕,取出样包,置样包于通风处使乙醚挥发。将样包放人105C烘箱中干燥2 h,取出,在干燥器中冷却,称重(M2)。五、结果计算脂肪含量=【(M1-M2)/M】x100%式中:M1--为第一次烘干的重量,g;M2--为第二次烘干的重量,g;100%--为换算因数;M--为称取试样的质量,g。
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发布时间: 2021 - 09 - 24
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今天给大家分享一下如何通过比色法对Vc的含量进行测定,如下:一、试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。1. Vc标准液:准确称取抗坏血酸0.1000g,用配好的草酸-EDTA定容至100ml。2. 草酸-EDTA:称取含结晶水的草酸6.3000g,EDTA 0.0584g,充分溶解后定容至1000ml。3. 偏磷酸-乙酸:称取15.0000g偏磷酸于40ml乙酸中,定容至500ml,用滤纸过滤,取滤液备用。4. 5%H2SO4:吸取5ml硫酸稀释至100ml。5.  5%钼酸铵:准确称取钼酸铵25.0000g,定容至500ml。二、主要仪器万分之一分析天平、UV-1800PC紫外可见分光光度计三、试样的制备待测样品混匀后装入塑封袋4℃冷藏备用。四、分析步骤4.1 试样溶液制备称取植物物组织2~5g(根据维生素C含量而定),加5ml草酸-EDTA溶液磨成匀浆,并转入25ml容量瓶中,再用提取介质冲洗研钵及研锤2~3次,冲洗液合并于25ml容量瓶中。取一部分匀浆经3000g离心10min后保存。4.2 标准曲线绘制吸取VC标准溶液 0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0分别置于50mL比色管中,用草酸-EDTA补充至5ml,加入偏磷酸-乙酸0.5ml,加入5%硫酸1ml,再加入5%钼酸铵2ml。加完试剂摇匀后,置30℃水浴中保温15min,用蒸馏水稀释到25 mL刻度,将溶液混匀,用空白管调零,在760nm波长下比色,记录吸光度,以标准维生素C含量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。4.3 样品的测定取1ml上清液与标曲同法测定。若样品显色液中出现沉淀时,可过滤后比色,不影响测定结果。五、结果计算植物组织中维生素C的含量(mg)=式中:C——标准曲线上查得样品中维生素含量(mg);Vt——样品提取液总体积(ml);Vs——测定时用样品液体积(ml);FW——植物组织鲜重(g)。【附注】温度对显色有影响,颜色强度随时间的延长而加深,因此显色温度和加入显色剂的时间要求一致。
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发布时间: 2021 - 09 - 23
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一、试剂1.浓磷酸: ρ(H3PO4)= 1.7 1g/ml2.氯化钾溶液 (KCl) =1mol/L (74.55gKCl, 1L水)3.亚硝酸钠: 优级纯,干燥器中干燥24h。①亚硝酸钠标准储备液: p(NO2- N) = 1000mg/ml; (4.926g 亚硝酸钠,适量水溶解,定容至1L) (存于PE瓶中,4℃,6个月)②亚硝酸钠标准使用液1: p(NO2- N)= 100mg/ml; (10ml 储备液。定容至100ml容量瓶)③亚硝酸钠标准使用液2: p(NO2-N)= 10mg/ml; (10ml 使用液1。定容至100ml容量瓶)4.显色剂: ( 20ml磺胺、20ml盐酸萘基溶液、20ml 浓磷酸与100ml去离子水混合,储于棕色试剂瓶中,4℃保存, 溶液变黑时停止使用)①磺胺溶液 (C6H8N2O2S): (1000ml容量瓶中加入600ml水,再加入200ml浓磷酸,再加入80g磺胺,定容,4℃, 1年)②盐酸N- (1萘基) -乙二胺溶液: (0.4g 该物质溶于100ml水中。4℃保存,溶液颜色变深时停止使用)二、主要仪器振荡器 、离心机 、分光光度计三、试样的制备样品采集。样品保存:样应该在4℃下保存和运输,在3日内分析完毕,否则应该在-20℃ (深度冷冻)下保存。试样制备:采集后去除杂物,混匀,过18目筛,一份测定干物质质量,一份测定亚硝态氮试料制备。四、分析步骤4.1 试样溶液提取称取 40g试样(空白不加试样),放入500ml PE瓶中,加入200mlKCl (物液比1:5), 在20C°恒稳水浴振荡器中振荡提取1h。a)转移约60ml提取液,于100ml聚乙烯离心管中,在3000rpm的条件下分离10min。取离心后上清液50ml于100ml比色管中。(或者在4℃下, 以静置4h的方式代替离心分离,制得试料)4.2 空白溶液制备氯化钾溶液4.3 标准曲线绘制将标准使用液2稀释10倍,制得N02-N 1mg/ml标准使用液3,取7支25ml洁净比色管,分别加入标准使用液3:0,0.1,0.3,0.5,0.7,0.9,1.1ml(相当于分别含N02-N 0,0.1,0.3,0.5,0.7,0.9,1.1mg),加20ml水,加0.2ml显色剂,定容至25ml混匀,室温静置60min后于波长540nm处比色,绘制标准曲线4.4 试样测定取样品提取液适量,其余按标曲,于540nm处比色,记录吸光值。五、结果计算式中:C — 从标曲查的样本测量液中NO2-N含量mg;Vt — 提取液总体积ml;Vc — 测量液体积...
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发布时间: 2021 - 09 - 18
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土壤蔗糖酶是作用物β-D-呋喃果糖苷中未还原的β-D-呋喃果糖苷末端残基的水解酶,能酶促土中蔗糖水解成葡萄糖和果糖。今天,我们就来聊聊如何通过靛酚蓝比色法检测土壤蔗糖酶。一.试剂 (1)3,5-二硝基水杨酸溶液:称0.5g二硝基水杨酸,溶于20ml 2N氢氧化钠和50ml水中,再加18.2g酒石酸钾钠,用水稀释至100ml(不超过7天)。  (2)pH5.5磷酸缓冲液:1/15M磷酸氢二钠(11.867g Na2PO4•2H2O溶于1L蒸馏水中)0.5ml加1/15M 磷酸二氢钾(9.078g KH2PO4溶于1L蒸馏水中)9.5ml即成。 (3)8%蔗糖溶液。 (4)甲苯。  (5)标准葡萄糖溶液:将葡萄糖先在50-58℃条件下,真空干燥至恒重。然后取500mg溶于100ml 12mmol苯甲酸溶液中(5mg还原糖/ml),即成标准葡萄糖溶液。 二.主要仪器万分之一分析天平,恒温箱,水浴锅,分光光度计三.试样的制备取新鲜的实验室待测样品充分混匀后,按四分法缩减至 100g,粉碎,然后全部通过 10目孔径筛,装入样品袋备用。 四.分析步骤  4.1 试样溶液提取称取试样2g,精准至0.001g,置于50ml三角瓶中,注入15ml 8%蔗糖溶液,5ml pH5.5磷酸缓冲液和0.25ml甲苯。摇匀混合物后,放入恒温箱,在37℃下培养24h。到时取出,迅速过滤,滤液供蔗糖酶的测定。4.2 空白溶液制备除不加待测样品外,应用的试剂和步骤操作同4.14.3 对照试样溶液制备除用蒸馏水代替蔗糖溶液外,应用的试剂和步骤操作同4.14.4 标准曲线绘制取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml含5mg还原糖/ml的标准葡萄糖溶液到50ml容量瓶中,加3ml 3,5-二硝基水杨酸,并在沸水的水浴锅中加热5min,随即将容量瓶移至自来水流下冷却3min。溶液因生成3-氨基-5-硝基水杨酸而呈橙黄色,最后用蒸馏水稀释至50ml,并在分光光度计上于波长508nm处进行比色。   4.5 试样测定从样品滤液中吸取1ml,若浓度过低,可多取滤液。注入50ml容量量瓶中,加3ml 3,5-二硝基水杨酸,同测定标准曲线同样的方法进行显色比色。     五.结果计算  蔗糖酶活性以24h后1g土壤葡萄糖的毫克数表示。 葡萄糖(...
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发布时间: 2021 - 09 - 17
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一、 试剂:1、0.2mol/l盐酸溶液2、0.1mol/l氢氧化钠溶液3、酚酞指示剂二、 主要仪器:电热板,锥形瓶三、 试样的制备:取风干的实验室待测样品充分混匀后,取待测样品充分混匀后,按四分法缩减至100g,粉碎,然后全部通过60目孔径筛,装入样品袋备用。 四、 分析步骤:称取适量土壤样本,放入150ml锥形瓶中,然后准确加入0.2mol/l盐酸溶液10ml,轻轻摇匀,放置过夜,使之彻底反应。将锥形瓶放于电热板上微沸3-5分钟以除去溶液中CO2,冷后用滤纸过滤,并用除去CO2的去离子水洗涤数次,收集所有滤液,加3滴酚酞指示剂,将滤液微热后用0.1 mol/l氢氧化钠溶液滴定至粉红色即为终点。五、 结果计算:C1、C2—HCL与NaOH钠溶液浓度(mol/l);V1、V2—HCL与NaOH钠溶液体积(ml);M—土壤样品质量(g);0.05—1/2CaCO3摩尔质量(kg/mol)。 参考文献:鲍士旦.土壤农化分析.北京:中国农业出版社,1999:30-33,201-205
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