028-8525-3068
新闻动态 News
News 技术交流
脱氢酶是一类氧化还原酶,它的作用是催化氢从被氧化的物体(基质AH)中转移到另一个物体(受氢体B)上:AH+B⇄A+BH已知受氢体可以接受脱氢酶脱出的氢原子,根据接受氢原子的量可以判断脱氢酶的活性。无色的氯化三苯基四氮唑(TTC,俗称红四唑)接受氢后变成红色的三苯基甲瓒(TF),根据产生红色的色度进行比色定量分析,就可以判断脱氢酶的活性。一、主要仪器和试剂分光光度计(UV-1800PC,上海美普达仪器有限公司)电子分析天平(JJ124BC,常州市双杰测试仪器厂)离心机(KH20A,湖南凯达科学仪器有限公司)水浴锅(HH-6孔,祥达仪器)0.36%Na2SO3 溶液:称取0.3657g亚硫酸钠溶于100ml蒸馏水中;0.05M Tris-HCl缓冲液(PH=7.6):称取三羟甲基氨基甲烷,加1.0MHCl 20毫升,蒸馏水定容至1L;0.4%TTC(氯化三苯基四氮唑):称取0.4克TTC溶于100毫升蒸馏水中,每周新配;Na2S2O4,甲醛,丙酮(分析纯)二、操作步骤1. 标准曲线的绘制(1)按下表配置系列浓度的TTC标准溶液。(2)显色用药匙向每只比色管中各加入少许连二亚硫酸钠(Na2S2O4),混匀,使TTC全部还原为红色的TF。用1~5ml移液枪向各管滴加1ml甲醛终止反应,摇匀后再加入2ml丙酮震荡摇匀,37℃水浴10min。(3)测定吸光度,绘制标准曲线。在485nm波长下测...
发布时间: 2022 - 06 - 15
浏览次数:0
作者:
发布时间: 2021 - 10 - 29
点击次数: 0
可溶性蛋白指可以以小分子状态溶于水或其他溶剂的蛋白。通常在植物生理、微生物、食品加工等实验中作为重要指标。如可溶性蛋白是植物抗旱性的重要指标之一。今天栢晖生物就给大家分享一下如何通过考马斯亮蓝染色法测定植物中的可溶性蛋白:“1试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。1.1 考马斯亮蓝溶液配制:称取100 mg考马斯亮蓝,溶于50ml 90%乙醇中,加入100ml 85%(W/V)磷酸,再用蒸馏水定容到1L。在过夜后过滤并贮于棕色瓶中,常温下可保存一个月。1.2 90% 乙醇1.3 100 g/ml 牛血清蛋白(BSA)标准溶液:称取10mg BSA定容至100 ml即为100 g/ml。或称取25 mg BSA加蒸馏水水溶解后定容至100 ml,再从中吸取40 ml蒸馏水定容至100ml。1.4 0.05 mol/LpH7.8磷酸配制:A母液,0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液:取Na2HPO4·12H2O (分子量358.14)35.85 g,用蒸馏水定容至500 ml。B母液,0.2 mol/L磷酸二氢钠溶液:取NaH2PO4·2H2O (分子量156.01)1.5601 g,用蒸馏水定容到50 ml。1.5 0.05M pH7.8磷酸:分别取A母液228.75ml,B母液21.25ml,用蒸馏水定容至1000ml。“2主要仪器万分之一分析天平、紫外可见分光光度计、离心机“3试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后,籽粒全部通过 0.25mm(秸秆通过 0.5mm)孔径筛,装入样品瓶备用。“4分析步骤4.1 试样溶液制备样品提取:取鲜样0.2—0.5g,用蒸馏水或缓冲液研磨成匀浆后,3000r/min—4000r/min离心10min,上清液备用。4.2 标准曲线绘制取6支具塞试管,依次加入标液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml,然后用蒸馏水补充至1ml,再向各管中加入5ml考马斯亮蓝试剂,5min左右,以0号试管为空白对照,在595nm下比色测定吸光度,以蛋白质含量为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。4.3 样品的测定吸取样品提取液1.0ml(视蛋白质含量适当稀释),放入试管中(每个样品重复两次),加入5ml考马斯亮蓝试剂,摇匀,放置2min待反应完成,在595nm下比色,测定吸光度,并通过标准曲线查蛋白质含量。“5结果计算式中:C—查标准曲线值,g;Vt—提取液总体积,ml;WF—样品鲜重,g;Vs—测定时加样量,ml所得结果应保留小数点后三位
作者:
发布时间: 2021 - 10 - 08
点击次数: 0
植物体经灼烧后其中的水分被全部除去,干物质被炭化分解,蕞后的残留物称为“粗灰分”。植物干物质中粗灰分的含量,随植物种类、品种、不同器官和部位、生育期以及生长环境和其他农业技术措施等因素而变动,但一般为2~7%,平均约5%。测定粗灰分的含量,可以了解各种植物在不同生育期和不同器官中养分吸收和累积状况以及土壤、施肥、气候、栽培管理等因素对植物灰分含量变化的影响。并且也是农产品及其加工产品的品质检定项目之一。今天栢晖生物给大家整理了如何通过灼烧法测定植物粗灰分:一、方法概要        称量一定质量的试样,在550℃~600℃高温下灼烧。是有机化合物分解挥发,矿物成分转化为氧化物或碳酸盐,统称粗灰分,用重量法测定。 二、主要仪器万分之一天平、瓷坩埚、干燥剂、马弗炉三、试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后,按四分法缩减至 100g,粉碎,籽粒全部通过 0.25mm(秸秆通过 0.5mm)孔径筛,装入样品瓶备用。四、操作步骤      将坩埚放入马弗炉中,于550℃下灼烧30min,待炉降温至200℃后,将坩埚移入干燥器中,冷却至室温后称量(M0)4.2 称取5.0g试样于已恒重的坩埚中称重(M1)4.3 将其移入预先加热到550℃的马弗炉中灼烧3h,直至试样完全灰化,无黑色炭粒,断电,立即取出坩埚,室温冷却2~3min,干燥器内平衡30min,称重(M2)五、结果计算      粗灰分(g·kg-1) = (M2-M0)/(M1-M0)×1000式中:      粗灰分—植物粗灰分            M0--瓷坩埚质量,g ;           M1--瓷坩埚加试样重量,g ;           M2--瓷坩埚加粗灰分质量,g;1000--换算因数。
作者:
发布时间: 2021 - 09 - 26
点击次数: 0
实验材料:植物样:青稞种子实验步骤:01:样品提取准确称取0.5g经研磨的样本,放在100ml的烧杯中,先以少量蒸馏水调成糊状,然后加50ml蒸馏水,搅匀,置于50℃恒温水浴中保温20min,使还原糖浸出。离心或过滤,用20ml蒸馏水洗残渣,再离心或过滤,将两次离心的上清液或滤液全部收集在100ml的容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,混匀,作为还原糖待测液。02:制作标准曲线取7支具有25ml刻度的血糖管或刻度试管,编号,按比例精确加入浓度为1mg/ml的葡萄糖标准液和3,5-二硝基水杨酸试剂。将各管摇匀,在沸水浴中加热5min,取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温,再以蒸馏水定容至25ml刻度处,用橡皮塞塞住管口,颠倒混匀(如用大试管,则向每管加入21.5ml蒸馏水,混匀)。在540nm波长下,用0号管调零,分别读取1~6号管的消光值。以消光值为纵坐标,葡萄糖mg为横坐标,绘制标准曲线,求得直线方程。03:显色测定取3支25ml刻度试管,编号,分别加入还原糖待测液2ml,3,5-二硝基水杨酸试剂1.5ml,其余操作均与制作标准曲线相同,测定各管的吸光值。04:数据处理  分别在标准曲线上查出相应还原糖mg数,计算还原糖百分含量。◆  ◆  ◆其他还原糖检测方法1、DNS法测各种还原糖标准曲线原理:3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid, DNS)在碱性条件下与还原糖的还原末端反应生成橙黄至棕红色的氨基化合物,在一定范围内,还原糖的量和反应液的颜色强度呈正比例关系。  引伸:植物还原糖检测试剂盒是还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸,3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物。在一定范围内,还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈一定比例关系。测定棕红色物质的吸光度,该吸光度值与还原糖含量呈线性关系,利用比色法和标准曲线测得样品中的还原糖的含量。2、铁氰化钾法根据蔗糖的非还原性,用生成物(葡萄糖和果糖)能够还原菲林溶液中的铜,再根据生成的氧化亚铜的量求出糖的含量。先制备还原糖待测混合液,通过0.1N的硫代硫酸钠滴定,达到当量点前,注入淀粉指示剂滴定至蓝色消失。土壤的转化酶活性,以单位土重的0.1N硫代硫酸钠毫升数(对照与试验测定的差)表示。测各种还原糖标准曲线原理:铁氰化钾[K3Fe(CN)6〕本身为黄色(吸收峰在420nm)左右,而与还原糖反应可生成无色的亚铁氰化钾[K4 Fe( CN)6 ],在一定范围内,还原糖的量和反应液的颜色...
作者:
发布时间: 2021 - 09 - 26
点击次数: 0
一般意义上的粗脂肪是指将经前处理的、分散且干燥的样品用乙醚或石油醚等溶剂回流提取,使样品中的脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物。今天我们就来分解一下如何通过残余法检测粗脂肪:一、试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。无水乙醚二、主要仪器万分之一天平、索氏提取器三、试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后,按四分法缩减至100g,粉碎,装入样品瓶备用。四、分析步骤4.1 按规定称取试样(M)(准确至0.0001 g),用滤纸包好,在105 C烘箱中干燥3 h取出,在干燥器中冷却,称重(M1)。4.2 将样包装人索氏脂肪抽提器抽提筒中,再倒人无水乙醚,完全浸泡样包,连接好索氏抽提器各部分,浸泡至少16h。4.3 将浸泡后无水乙醚放入抽提瓶中,在抽提瓶中放人几粒沸石,然后,往抽提瓶中倒入无水乙醚使之完全浸泡样包,连接好仪器各部分,接通冷凝水,在70~80 C水浴上加热,使乙醚回流,控制乙醚回流次数为8次/h,即乙醚回滴速度为120~ 150滴/min,抽提6 h。4.4 抽提完毕,取出样包,置样包于通风处使乙醚挥发。将样包放人105C烘箱中干燥2 h,取出,在干燥器中冷却,称重(M2)。五、结果计算脂肪含量=【(M1-M2)/M】x100%式中:M1--为第一次烘干的重量,g;M2--为第二次烘干的重量,g;100%--为换算因数;M--为称取试样的质量,g。
作者:
发布时间: 2021 - 09 - 24
点击次数: 0
今天给大家分享一下如何通过比色法对Vc的含量进行测定,如下:一、试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。1. Vc标准液:准确称取抗坏血酸0.1000g,用配好的草酸-EDTA定容至100ml。2. 草酸-EDTA:称取含结晶水的草酸6.3000g,EDTA 0.0584g,充分溶解后定容至1000ml。3. 偏磷酸-乙酸:称取15.0000g偏磷酸于40ml乙酸中,定容至500ml,用滤纸过滤,取滤液备用。4. 5%H2SO4:吸取5ml硫酸稀释至100ml。5.  5%钼酸铵:准确称取钼酸铵25.0000g,定容至500ml。二、主要仪器万分之一分析天平、UV-1800PC紫外可见分光光度计三、试样的制备待测样品混匀后装入塑封袋4℃冷藏备用。四、分析步骤4.1 试样溶液制备称取植物物组织2~5g(根据维生素C含量而定),加5ml草酸-EDTA溶液磨成匀浆,并转入25ml容量瓶中,再用提取介质冲洗研钵及研锤2~3次,冲洗液合并于25ml容量瓶中。取一部分匀浆经3000g离心10min后保存。4.2 标准曲线绘制吸取VC标准溶液 0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0分别置于50mL比色管中,用草酸-EDTA补充至5ml,加入偏磷酸-乙酸0.5ml,加入5%硫酸1ml,再加入5%钼酸铵2ml。加完试剂摇匀后,置30℃水浴中保温15min,用蒸馏水稀释到25 mL刻度,将溶液混匀,用空白管调零,在760nm波长下比色,记录吸光度,以标准维生素C含量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。4.3 样品的测定取1ml上清液与标曲同法测定。若样品显色液中出现沉淀时,可过滤后比色,不影响测定结果。五、结果计算植物组织中维生素C的含量(mg)=式中:C——标准曲线上查得样品中维生素含量(mg);Vt——样品提取液总体积(ml);Vs——测定时用样品液体积(ml);FW——植物组织鲜重(g)。【附注】温度对显色有影响,颜色强度随时间的延长而加深,因此显色温度和加入显色剂的时间要求一致。
微信公众号
微信公众号
Q  Q : 2105984845
地址:中国四川省成都市成华区成宏路72号-四川检验检测创新科技园2号楼4层
电话:028 8525 3068
传真:+86 0755-2788 8009
Copyright ©2005 - 2013 成都栢晖生物科技有限公司
犀牛云提供企业云服务