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01土壤碳氮磷相关指标汇总分类相关指标汇总分类" data-fail="0" style="margin: 0px; padding: 0px; outline: 0px; vertical-align: middle; width: 677px; box-sizing: border-box !important; overflow-wrap: break-word !important; height: auto !important; visibility: visible !important;" title="土壤与植物相关指标汇总分类" imageid="0"/(点击图片放大)02植物碳氮磷相关指标汇总分类相关指标汇总分类" data-fail="0" style="margin: 0px; padding: 0px; outline: 0px; vertical-align: middle; width: 677px; box-sizing: border-box !important; overflow-wrap: break-word !important; height: auto !important; visibility: vi...
发布时间: 2023 - 10 - 26
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发布时间: 2022 - 06 - 21
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一、试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。实验用水均为蒸馏水或去离子水。(1)甲苯(2)1%羧甲基纤维素溶液:1g 羧甲基纤维素钠,用50%的乙醇溶至100ml。(3)pH5.5醋酸盐缓冲液:0.2mol/L 醋酸溶液 11.55ml 95% 冰醋酸溶至1L;0.2mol/L 醋酸钠溶液 16.4g C2H3O2Na或27.22g C2H3O2Na·3H2O溶至1L;取11ml 0.2mol/L 醋酸溶液和88ml 0.2mol/L 醋酸钠溶液混匀即成PH 5.5醋酸盐缓冲液。(4)3,5-二硝基水杨酸溶液:称1.25g二硝基水杨酸,溶于50ml 2mol/L NaOH和125ml水中,再加75g酒石酸钾钠,用水稀释至250ml(保存期不过7天)。(5)葡萄糖标准液(1mg/mL)预先将分析纯葡萄糖置80℃烘箱内约12小时。准确称取50mg葡萄糖于烧杯中,用蒸馏水溶解后,移至50mL容量瓶中,定容,摇匀(冰箱中4℃保存期约一星期)。若该溶液发生混浊和出现絮状物现象,则应弃之,重新配制。二、仪器分析天平(0.0001 g)、50ml试管、恒温箱、水浴锅(HH-4)、吸管(10 ml)、三角瓶(50 ml)、小漏斗、量筒(100 ml)、角匙、试管夹、吸耳球、试剂瓶(500ml)、记号笔等。三、葡萄糖标准曲线分别吸1mg/mL的标准葡糖糖溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mL于试管中,再补加蒸馏水至1mL,加DNS溶液3ml混匀,于沸腾水浴中加热5min,取出立即泠水浴中冷却至室温,以空白管调零在波长540nm处比色,以OD值为纵坐标,以葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线。四、实验步骤称10g土壤置于50ml三角瓶中,加入1.5ml甲苯,摇匀后放置15min,再加5ml 1%羧甲基纤维素溶液和5ml pH5.5醋酸盐缓冲液,将三角瓶放在37℃恒温箱中培养72h。培养结束后,过滤并取1ml滤液,然后按绘制标准曲线显色法比色测定。(为了消除土壤中原有的蔗糖、葡萄糖而引起的误差,每一土样需做无基质对照,整个试验需做无土壤对照;如果样品吸光值超过标曲的最大值,则应该增加分取倍数或减少培养的土样。)五、结果计算纤维素酶活性以72h,10g干土生成葡萄糖毫克数表示。其中:a样品、a无土、a无机质分别表示其由标准曲线求的葡萄糖毫克数;n为分取倍数;m表示烘干土重。
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发布时间: 2022 - 06 - 15
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脱氢酶是一类氧化还原酶,它的作用是催化氢从被氧化的物体(基质AH)中转移到另一个物体(受氢体B)上:AH+B⇄A+BH已知受氢体可以接受脱氢酶脱出的氢原子,根据接受氢原子的量可以判断脱氢酶的活性。无色的氯化三苯基四氮唑(TTC,俗称红四唑)接受氢后变成红色的三苯基甲瓒(TF),根据产生红色的色度进行比色定量分析,就可以判断脱氢酶的活性。一、主要仪器和试剂分光光度计(UV-1800PC,上海美普达仪器有限公司)电子分析天平(JJ124BC,常州市双杰测试仪器厂)离心机(KH20A,湖南凯达科学仪器有限公司)水浴锅(HH-6孔,祥达仪器)0.36%Na2SO3 溶液:称取0.3657g亚硫酸钠溶于100ml蒸馏水中;0.05M Tris-HCl缓冲液(PH=7.6):称取三羟甲基氨基甲烷,加1.0MHCl 20毫升,蒸馏水定容至1L;0.4%TTC(氯化三苯基四氮唑):称取0.4克TTC溶于100毫升蒸馏水中,每周新配;Na2S2O4,甲醛,丙酮(分析纯)二、操作步骤1. 标准曲线的绘制(1)按下表配置系列浓度的TTC标准溶液。(2)显色用药匙向每只比色管中各加入少许连二亚硫酸钠(Na2S2O4),混匀,使TTC全部还原为红色的TF。用1~5ml移液枪向各管滴加1ml甲醛终止反应,摇匀后再加入2ml丙酮震荡摇匀,37℃水浴10min。(3)测定吸光度,绘制标准曲线。在485nm波长下测定各管溶液的吸光度A,并以A为纵坐标,TTC浓度为横坐标,绘制出TTC标准曲线。2.壤脱氢酶活性的测定(1)培养并显色首先,按下表向四支离心管中分别加入以下物质然后将以上四支离心管避光,37℃保温培养24h。(2)培养结束后,用1~5ml可调试移液枪向各管分别加入1ml甲醛终止反应;再分别加入2ml丙酮震荡并于37℃下水浴保温10min。(3)离心;将各离心管置于离心机中,4000r/min离心5min。(4)测吸光度;取上清液在485nm波长下测定吸光度A,在标准曲线上查出相应的TTC浓度。3.土壤脱氢酶活性的计算脱氢酶活性(ug/g土/24h)=A×B×C式中:A为标准曲线中查的TTC浓度(μg/ml);B为培养时间的校正值(h);C为比色时的稀释倍数.
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发布时间: 2022 - 05 - 05
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今天给大家分享一下如何用酸水解-蒸馏法测定土壤中有机氮组分(氨基酸态氮、氨基糖态氮、酸解铵态氮、酸解总氮)。操作步骤如下:·1)土壤水解液的制备:称取适量过0.25mm筛的土壤样品,放入具有磨口接头的三角瓶中,加入2滴正辛醇和20ml和6ml的HCI,摇动瓶子使土壤和酸液充分混匀,将瓶子放入有温控功能的远红外消煮炉中,在瓶口装上有玻璃磨口接头的冷凝管,接通冷凝水,打开电源开关,使温度控制在120±3℃,在回流条件下使土壤--酸混合液慢慢沸腾12小时。水解结束后,用中速蓝带滤纸将样品趁热过滤,滤液收集在100ml的烧杯中,用去离子水少量多次冲洗残渣,使滤液体积达到约6Oml。将盛有滤液的烧杯放在碎冰块中,借助PH计,逐滴慢慢加入5mol/L NaOH溶液,边加边搅拌,直到水解液的pH达5左右,再用0.5mol/L的NaOH进行中和,使水解液的pH达6.5±0.1,用小漏斗把酸解液转移到I00ml容量瓶中,定容至刻度。2)酸解液中氮素形态的测定(1)酸解液全氮的测定:取样前,先倒转容量瓶几次,使悬浮液均匀,并用末端较宽的移液管吸取5ml酸解液,放入消煮管中,加入0.5克定氮混合催化剂和2ml浓硫酸,380℃温度下消煮1.5小时。冷却后将消煮管连接到定氮仪上,加10ml 10mol/L NaOH,蒸馏约4分钟,流出液用硼酸吸收,蒸馏结束后用0.0055 mol/L H2SO4滴定。(2)铵态氮的测定取10ml已中和的酸水解液,放入消煮管中,加入2mL 3.5%的MgO悬浮液,立即连接蒸馏装置,蒸馏约2分钟后滴定。(3)氨基糖态氮的测定取已中和的酸水解液10ml于消煮管中,加入10ml磷酸一硼酸缓冲液(PH11.2),连接蒸馏装置,蒸馏4分钟,滴定。此测定结果减去铵态氮,即为氨基糖态氮。(4)氨基酸态氮的测定取5ml已中和的酸水解液于消煮管中,加入1ml 0.5mol/L NaOH溶液,在沸水中加热直到溶液减至2-3ml,取出冷却,加入0.5g柠檬酸和0.1g茚三酮,将消煮管放回沸水浴中,加热1分钟后,旋转消煮管(不放开水浴)3分钟,再在水浴中保持9分钟,取出冷却后,加入10ml磷酸--硼酸缓冲液和1ml 5mol/L NaOH,蒸馏4分钟,滴定。(5)未知态氮= 水解总氮- (铵态氮+氨基糖态氮+氨基酸态氮)(6)非水解氮= 土壤总氮-水解液总氮
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发布时间: 2022 - 04 - 27
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方法原理:第一步在待测液中加入酚酞指示剂,用标准酸滴定至溶液由红色变为无色(PH8.3),此时CO32-只被中和为HCO3-;第二步加入甲基橙指示剂,继续用标准酸滴定至溶液由黄色变为橙红色(PH3.8),此时溶液中原有的HCO3-和第一步由CO32-生成的HCO3-全被中和为CO32-。由标准酸的两次用量可分别求得土壤中CO32-和HCO3-的含量。仪器及试剂:往复式电动振荡机;漏斗;广口瓶,500ml;具塞三角瓶,500ml去除二氧化碳的水:将蒸馏水煮沸15min,冷却后立即使用;硫酸标准溶液:吸取28mL浓硫酸(p=1.84)加入1L去二氧化碳水中,此溶液浓度约为0.lmol/L硫酸标准溶液。将此溶液用碳酸钠标定后,准确稀释5倍,即为c(1/2H2S04)=0.02mol/L的硫酸标准溶液;0.5%(m/v)酚酞指示剂:称取0.5g酚酞溶于100ml50%(v/v)乙醇溶液.0.1%(m/v)甲基橙指示剂:称取0.1g甲基橙溶于100mL水中.分析步骤:(1)称取过2mm孔径筛的风干试样50g(精确至0.01g),置于500mL广口瓶(矿泉水瓶)中,加250mL去除CO2的水,用橡皮塞塞紧瓶口,在振荡机上振荡3min,立即过滤,开始滤出的10mL滤液弃去,以获得清亮的滤液,加塞备用。电导、CO32-、HCO3-等项测定应立即进行,其他离子的测定亦应在当天完成。(2)吸取试样待测液25.00mL放入150mL三角瓶中,加入酚酞指示剂2滴,如待测液不显红色,表示没有CO32-存在,如溶液显红色,用硫酸标准溶液滴定至红色刚消失为止,记录所用硫酸标准溶液的体积(V1)。在滴定过的溶液中加入甲基橙指示剂2滴,用硫酸标准溶液滴定至由黄色转变成明显的橙红色为止。记录加甲基橙后滴定所用硫酸标准溶液的体积(V2)。结果计算:CO32-(g/kg)=2V1×C×D×1000/m×0.030HCO3-(g/kg)=(V2-V1)×C×D×1000/m×0.061C--硫酸标准溶液浓度;D--分取倍数,250/25;M--称取试样质量,g
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发布时间: 2022 - 04 - 26
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一、 实验原理和目的     根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比 。 叶绿素和类胡萝卜素在95%的乙醇提取液中的最大吸收峰波长不同, 叶绿素(95%乙醇)在665nm、649nm,类胡萝卜素在470nm有最大吸收峰,根据在分光光度计下测定的吸光度,求得叶绿素及类胡萝卜素的含量。二、 实验器具和步骤  实验器具:分光光度计(UV-1800PC,上海美普达仪器有限公司)、电子天平(ES-J220,天津市德安特传感技术有限公司)、研钵、 试管、小漏斗、滤纸、吸水纸、 移液管、量筒、剪刀  ;试剂: 95%乙醇(或80%丙酮)、石英砂、碳酸钙粉; 步骤:1.称取剪碎的新鲜样品0.1g 左右,放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及3~5ml 95%乙醇,研成均浆,继续研磨至组织变白,静置3~5min 。2. 取滤纸1张,置漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,过滤到10ml试管中,用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中。 3.用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入漏斗中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至10 ml ,摇匀。4.把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95%乙醇为空白,在波长665nm、649nm、470nm下测定吸光度 计算公式:  Ca=13.95A665-6.88A649; Cb=24.96A649-7.32A665   Cx=(1000A470-2.05Ca-114.8Cb)/245更多相关讯息so栢晖生物
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