作者:
发布时间:
2024
-
08
-
14
点击次数:
0
间苯二酚比色法Baihui Organisms01样品提取在110℃烘箱烘15min,然后调至70℃烘干至恒重。实验材料(各种植物叶片或种子)磨碎后, 秤取50mg样品倒入10ml刻度离心管内加入4ml 80%乙醇,至于80℃水浴中不断搅拌40min ,离心,收集上清液,其残渣加2ml 80%乙醇重复提2次,合并上清液。80%乙醇定容至10ml,过滤后取滤液测定。02制作标准曲线取蔗糖标准液用80%乙醇稀释成系列(0、10、20、30、40、60、80、100ug/ml)浓度的溶液。分别取0.4ml溶液,各自加入200ul 2mol/L NaOH,100℃煮沸5min,冷却,加入2.8ml 30%HCl,0.8ml 0.1%间苯二酚,摇匀,80℃水浴反应10min,冷却后在480nm测定OD值,以0浓度管调零。绘制蔗糖浓度-OD值曲线。03显色测定取提取液0.4ml,按上述步骤进行蔗糖含量的测定,读取OD值,并从标准曲线得到提取液中的糖含量,然后再进行计算样品中的蔗糖含量。蒽酮法Baihui Organisms01实验原理用碱性溶液同植物材料的可溶性糖提取液一起加热,破坏其中的还原糖。然后用蒽酮法在较低的温度下,测定蔗糖中的果糖部分。不含果糖苷的其他糖类在较低的温度下不与蒽酮显色,材料中如含有其他带有果糖苷的非还原糖(如:棉子糖、松三糖和土木香粉)对测定会有干扰,但是在有蔗糖存在的生物材料中这些糖几乎是不存在的。02实验步骤植物材料(植物的根、茎、叶)在110℃下杀青,经70~80℃烘干研磨, 80%的乙醇,在80℃下提取半小时,离心取上清液,共提取3次。合并上清液,加少许(约0.1克)活性炭脱色,并定容至10ml。根据蔗糖含量的多少吸取0.1~ 1.0ml于试管中,沸水浴中加热浓缩至0.05~0.1ml (不要大于0.1ml,否则显色时间要延长),加入0.1ml30%的KOH,在沸水浴中放10min, 冷却至室温。加入3ml蒽酮试剂,40 ℃保温10~15min, 在620nm测定吸光度值。同时取20~100ug蔗糖(在0.1ml体积中)于一系列试管中, 加入0.1ml30%KOH以同法显色,做成标准曲线。更多科研检测相关讯息so栢晖生物了解更多