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2024
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间苯二酚比色法Baihui Organisms01样品提取在110℃烘箱烘15min，然后调至70℃烘干至恒重。实验材料（各种植物叶片或种子）磨碎后， 秤取50mg样品倒入10ml刻度离心管内加入4ml 80%乙醇，至于80℃水浴中不断搅拌40min ，离心，收集上清液，其残渣加2ml 80%乙醇重复提2次，合并上清液。80%乙醇定容至10ml，过滤后取滤液测定。02制作标准曲线取蔗糖标准液用80%乙醇稀释成系列（0、10、20、30、40、60、80、100ug/ml）浓度的溶液。分别取0.4ml溶液，各自加入200ul 2mol/L NaOH，100℃煮沸5min，冷却，加入2.8ml 30%HCl，0.8ml 0.1%间苯二酚，摇匀，80℃水浴反应10min，冷却后在480nm测定OD值，以0浓度管调零。绘制蔗糖浓度-OD值曲线。03显色测定取提取液0.4ml，按上述步骤进行蔗糖含量的测定，读取OD值，并从标准曲线得到提取液中的糖含量，然后再进行计算样品中的蔗糖含量。蒽酮法Baihui Organisms01实验原理用碱性溶液同植物材料的可溶性糖提取液一起加热，破坏其中的还原糖。然后用蒽酮法在较低的温度下，测定蔗糖中的果糖部分。不含果糖苷的其他糖类在较低的温度下不与蒽酮显色，材料中如含有其他带有果糖苷的非还原糖(如:棉子糖、松三糖和土木香粉)对测定会有干扰，但是在有蔗糖存在的生物材料中这些糖几乎是不存在的。02实验步骤植物材料（植物的根、茎、叶）在110℃下杀青,经70~80℃烘干研磨, 80%的乙醇，在80℃下提取半小时，离心取上清液，共提取3次。合并上清液，加少许(约0.1克)活性炭脱色，并定容至10ml。根据蔗糖含量的多少吸取0.1~ 1.0ml于试管中，沸水浴中加热浓缩至0.05~0.1ml (不要大于0.1ml,否则显色时间要延长)，加入0.1ml30%的KOH，在沸水浴中放10min， 冷却至室温。加入3ml蒽酮试剂，40 ℃保温10~15min, 在620nm测定吸光度值。同时取20~100ug蔗糖(在0.1ml体积中)于一系列试管中， 加入0.1ml30%KOH以同法显色，做成标准曲线。更多科研检测相关讯息so栢晖生物了解更多