作者：
发布时间：
2021
-
09
-
26
点击次数：
0
实验材料：植物样：青稞种子实验步骤：01：样品提取准确称取0.5g经研磨的样本，放在100ml的烧杯中，先以少量蒸馏水调成糊状，然后加50ml蒸馏水，搅匀，置于50℃恒温水浴中保温20min，使还原糖浸出。离心或过滤，用20ml蒸馏水洗残渣，再离心或过滤，将两次离心的上清液或滤液全部收集在100ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，混匀，作为还原糖待测液。02：制作标准曲线取7支具有25ml刻度的血糖管或刻度试管，编号，按比例精确加入浓度为1mg/ml的葡萄糖标准液和3,5-二硝基水杨酸试剂。将各管摇匀，在沸水浴中加热5min，取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温，再以蒸馏水定容至25ml刻度处，用橡皮塞塞住管口，颠倒混匀（如用大试管，则向每管加入21.5ml蒸馏水，混匀）。在540nm波长下，用0号管调零，分别读取1～6号管的消光值。以消光值为纵坐标，葡萄糖mg为横坐标，绘制标准曲线，求得直线方程。03：显色测定取3支25ml刻度试管，编号，分别加入还原糖待测液2ml，3,5-二硝基水杨酸试剂1.5ml，其余操作均与制作标准曲线相同，测定各管的吸光值。04：数据处理 分别在标准曲线上查出相应还原糖mg数，计算还原糖百分含量。◆ ◆ ◆其他还原糖检测方法1、DNS法测各种还原糖标准曲线原理:3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid, DNS)在碱性条件下与还原糖的还原末端反应生成橙黄至棕红色的氨基化合物，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度呈正比例关系。 引伸：植物还原糖检测试剂盒是还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物。在一定范围内，还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈一定比例关系。测定棕红色物质的吸光度，该吸光度值与还原糖含量呈线性关系，利用比色法和标准曲线测得样品中的还原糖的含量。2、铁氰化钾法根据蔗糖的非还原性，用生成物（葡萄糖和果糖）能够还原菲林溶液中的铜，再根据生成的氧化亚铜的量求出糖的含量。先制备还原糖待测混合液，通过0.1N的硫代硫酸钠滴定，达到当量点前，注入淀粉指示剂滴定至蓝色消失。土壤的转化酶活性，以单位土重的0.1N硫代硫酸钠毫升数（对照与试验测定的差）表示。测各种还原糖标准曲线原理:铁氰化钾[K3Fe(CN)6〕本身为黄色(吸收峰在420nm)左右，而与还原糖反应可生成无色的亚铁氰化钾[K4 Fe( CN)6 ]，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色...