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2025
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土壤氨基糖是指一类含有氨基和羟基的糖类化合物，主要来源于微生物细胞壁的残留以及微生物代谢产物。它们是土壤有机质的重要组成部分，具有较高的稳定性和微生物异源性，在土壤中能够长期保存。土壤氨基糖不仅是评估微生物对土壤有机碳、氮贡献的重要指标，还能通过不同组分的比值反映微生物群落组成的变化。常见的土壤氨基糖包括氨基葡萄糖、氨基半乳糖、氨基甘露糖和胞壁酸等，它们在土壤生态系统的物质循环和结构稳定中发挥着关键作用。土壤氨基糖来源：微生物合成：大部分来源于微生物残体（真菌/细菌生物量）植物输入：少量来自植物根系分泌物有机质转化：腐殖质结合态氨基糖（与铁铝氧化物共沉淀）实验方法气相色串联质谱01称取约0.5~1.0g的土样于水解管中，沿管壁加入5 mL 6 mol/L盐酸，用氮气置换水解管中空气2min后密封。在烘箱中105℃放置8h水解。02待水解液冷却至室温后，加入250μg肌醇。涡旋仪震荡30s混匀。取水解液于5mL离心管中，于8000rpm离心1min。取上清液1mL于50mL离心管中用氮气于吹干。用20mL纯水溶解残渣。用0.4mol/LKOH 0.01mol/LHCL调节pH至6.6~6.8。离心管以4000rpm离心10min，转移出上清液于100mL茄型瓶中，于65℃，25rpm旋转蒸发至干。再加入10mL无水甲醇溶解瓶中残渣。后转移至另一50mL离心管。氮吹至5mL左右，涡旋溶解管壁有机物后，以4000rpm离心10min，除盐。再将上清液转移到5mL衍生瓶中吹干。并加入100μg戊五醇1mL水，冻干。03 标准样品制备：同时准备3个标准样品。另取衍生瓶中加入100μL混标（1mg/mL的氨基葡萄糖、氨基半乳糖、0.5mg/mL氨基甘露糖，0.25mg/mL胞壁酸），50μg肌醇，100μg戊五醇，轻轻摇匀后，与样品衍生瓶一起冻干。04衍生：a) 向吹干的样品和标准样品的衍生瓶中加入300μL衍生试剂后盖紧。涡旋30s混匀。b) 在80℃水浴35min，每5min震荡一次。冷却后加入1mL醋酐，涡旋30s混匀，在80℃水浴25min，每5min震荡一次。衍生管冷却后加入1.5mL二氯甲烷，涡旋30s混匀。c) 往衍生管中加入1mL1mol/LHCL加盖密封后涡旋30s。静置分层后吸出上层无机相。d) 改加1mL纯水，重复上述步骤3次。最后一次尽量吸出无机相。e) 剩余有机相于45℃下氮吹干。溶解到400μL稀释剂中，然后转移到带内插管进样瓶中待测。图谱、计算 标准图谱： 校正因子计算： 结果计算：