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土壤亚硝态氮测定方法

日期: 2021-09-23
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土壤亚硝态氮测定方法

一、试剂

1.浓磷酸: ρ(H3PO4)= 1.7 1g/ml

2.氯化钾溶液 (KCl) =1mol/L (74.55gKCl, 1L水)

3.亚硝酸钠: 优级纯,干燥器中干燥24h。

①亚硝酸钠标准储备液: p(NO2- N) = 1000mg/ml; (4.926g 亚硝酸钠,适量水溶解,定容至1L) (存于PE瓶中,4℃,6个月)

②亚硝酸钠标准使用液1: p(NO2- N)= 100mg/ml; (10ml 储备液。定容至100ml容量瓶)

③亚硝酸钠标准使用液2: p(NO2-N)= 10mg/ml; (10ml 使用液1。定容至100ml容量瓶)

4.显色剂: ( 20ml磺胺、20ml盐酸萘基溶液、20ml 浓磷酸与100ml去离子水混合,储于棕色试剂瓶中,4℃保存, 溶液变黑时停止使用)

①磺胺溶液 (C6H8N2O2S): (1000ml容量瓶中加入600ml水,再加入200ml浓磷酸,再加入80g磺胺,定容,4℃, 1年)

②盐酸N- (1萘基) -乙二胺溶液: (0.4g 该物质溶于100ml水中。4℃保存,溶液颜色变深时停止使用)

二、主要仪器

振荡器 、离心机 、分光光度计

三、试样的制备

样品采集。

样品保存:样应该在4℃下保存和运输,在3日内分析完毕,否则应该在-20℃ (深度冷冻)下保存。

试样制备:采集后去除杂物,混匀,过18目筛,一份测定干物质质量,一份测定亚硝态氮试料制备。

四、分析步骤

4.1 试样溶液提取

称取 40g试样(空白不加试样),放入500ml PE瓶中,加入200mlKCl (物液比1:5), 在20C°恒稳水浴振荡器中振荡提取1h。

a)转移约60ml提取液,于100ml聚乙烯离心管中,在3000rpm的条件下分离10min。取离心后上清液50ml于100ml比色管中。(或者在4℃下, 以静置4h的方式代替离心分离,制得试料)

4.2 空白溶液制备

氯化钾溶液

4.3 标准曲线绘制

将标准使用液2稀释10倍,制得N02-N 1mg/ml标准使用液3,取7支25ml洁净比色管,分别加入标准使用液3:0,0.1,0.3,0.5,0.7,0.9,1.1ml(相当于分别含N02-N 0,0.1,0.3,0.5,0.7,0.9,1.1mg),加20ml水,加0.2ml显色剂,定容至25ml混匀,室温静置60min后于波长540nm处比色,绘制标准曲线

4.4 试样测定

取样品提取液适量,其余按标曲,于540nm处比色,记录吸光值。


五、结果计算

土壤亚硝态氮测定方法


式中:

C — 从标曲查的样本测量液中NO2-N含量mg;

Vt — 提取液总体积ml;

Vc — 测量液体积ml;

M — 测量样本重量g;


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