今天给大家分享一下如何通过比色法对Vc的含量进行测定，如下：
一、试剂
所有试剂除注明者外，均为分析纯。
1. Vc标准液：准确称取抗坏血酸0.1000g，用配好的草酸-EDTA定容至100ml。
2. 草酸-EDTA：称取含结晶水的草酸6.3000g，EDTA 0.0584g，充分溶解后定容至1000ml。
3. 偏磷酸-乙酸：称取15.0000g偏磷酸于40ml乙酸中，定容至500ml，用滤纸过滤，取滤液备用。
4. 5%H2SO4：吸取5ml硫酸稀释至100ml。
5. 5%钼酸铵：准确称取钼酸铵25.0000g，定容至500ml。
二、主要仪器
万分之一分析天平、UV-1800PC紫外可见分光光度计
三、试样的制备
待测样品混匀后装入塑封袋4℃冷藏备用。
四、分析步骤
4.1 试样溶液制备
称取植物物组织2~5g（根据维生素C含量而定），加5ml草酸-EDTA溶液磨成匀浆，并转入25ml容量瓶中，再用提取介质冲洗研钵及研锤2~3次，冲洗液合并于25ml容量瓶中。取一部分匀浆经3000g离心10min后保存。
4.2 标准曲线绘制
吸取VC标准溶液 0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0分别置于50mL比色管中，用草酸-EDTA补充至5ml，加入偏磷酸-乙酸0.5ml，加入5%硫酸1ml，再加入5%钼酸铵2ml。
加完试剂摇匀后，置30℃水浴中保温15min，用蒸馏水稀释到25 mL刻度，将溶液混匀，用空白管调零，在760nm波长下比色，记录吸光度，以标准维生素C含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4.3 样品的测定
取1ml上清液与标曲同法测定。若样品显色液中出现沉淀时，可过滤后比色，不影响测定结果。
五、结果计算
植物组织中维生素C的含量(mg)=
式中：
C——标准曲线上查得样品中维生素含量（mg）；
Vt——样品提取液总体积(ml)；
Vs——测定时用样品液体积（ml）；
FW——植物组织鲜重（g）。
【附注】
温度对显色有影响，颜色强度随时间的延长而加深，因此显色温度和加入显色剂的时间要求一致。