深秋时分，银杏叶四处飘散的景象令人着迷，踏上去如行走在棉花糖上...据相关资料显示，银杏叶为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L .的干燥叶。其主要含黄酮类（flavonoids）和萜烯内酯（terpene）类化合物。据医学药理研究证实，银杏叶黄酮具有抗炎症、抗环腺苷酸乙酯酶活性、抗组胺活性等多种效用。今天，栢晖生物就给大家梳理一下如何通过比色法测定植物中黄酮的含量。
一、试剂
所有试剂除注明者外，均为分析纯。
1.1 芦丁对照品、80%乙醇、30%乙醇、
1.2 0.05g/ml NaNO2:称取1.7225g亚硝酸钠定容到500ml。
1.3 0.1g/ml Al(NO3)3:称取18.7565g硝酸铝定容到500ml。
1.4 0.04g/ml NaOH溶液:称取0.8g氢氧化钠定容到500ml。
二、主要仪器
万分之一分析天平、紫外可见分光光度计
三、试样的制备
取风干的实验室待测样品充分混匀后，粉碎，籽粒全部通过 0.25mm（秸秆通过 0.5mm）孔径筛，装入样品瓶备用。
四、分析步骤
4.1 试样溶液制备
取待测样品，研细，精密称取约0.3g，用80%乙醇回流提取2次（每次用30ml）过滤，滤液合并后蒸干，用30%乙醇溶解并定容至10ml。
4.2 标准曲线绘制
标准工作曲线的绘制：精密量取芦丁对照品溶液0.0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml到10ml容量瓶中，各加入30%乙醇至1.0ml，加入0.5ml 0.05g/ml NaNO2溶液，放置6min后再加入0.3ml0.1g/ml Al(NO3)3溶液，摇匀，放置6min后加入3ml 0.04g/ml NaOH溶液，用水定容至标线，摇匀，放置15min，在510nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，芦丁对照品溶液的浓度为横坐标，绘制标准工作曲线。
4.3 样品的测定
精密量取样品溶液1.0ml，置于10ml容量瓶中，按照标准工作曲线绘制的方法，自加入0.5ml 0.05g/ml NaNO2溶液起依次测定吸光度，从标准工作曲线上查得样品溶液中芦丁的浓度，作为总黄酮的浓度，再计算求得总黄酮的含量。
五、结果计算
式中:
C——从标准曲线查得黄酮的含量，μg/g；
N——稀释倍数；
Vt——提取液总体积，ml；
Vs——测定取液量，ml；
0.001——将μg换算为mg；
m——样品称重量。所得结果应保留小数点后三位