实验材料：
植物样：青稞种子
实验步骤：
准确称取0.5g经研磨的样本，放在100ml的烧杯中，先以少量蒸馏水调成糊状，然后加50ml蒸馏水，搅匀，置于50℃恒温水浴中保温20min，使还原糖浸出。离心或过滤，用20ml蒸馏水洗残渣，再离心或过滤，将两次离心的上清液或滤液全部收集在100ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，混匀，作为还原糖待测液。
取7支具有25ml刻度的血糖管或刻度试管，编号，按比例精确加入浓度为1mg/ml的葡萄糖标准液和3,5-二硝基水杨酸试剂。将各管摇匀，在沸水浴中加热5min，取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温，再以蒸馏水定容至25ml刻度处，用橡皮塞塞住管口，颠倒混匀（如用大试管，则向每管加入21.5ml蒸馏水，混匀）。在540nm波长下，用0号管调零，分别读取1～6号管的消光值。以消光值为纵坐标，葡萄糖mg为横坐标，绘制标准曲线，求得直线方程。
取3支25ml刻度试管，编号，分别加入还原糖待测液2ml，3,5-二硝基水杨酸试剂1.5ml，其余操作均与制作标准曲线相同，测定各管的吸光值。
分别在标准曲线上查出相应还原糖mg数，计算还原糖百分含量。
1、DNS法
测各种还原糖标准曲线原理:3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid, DNS)在碱性条件下与还原糖的还原末端反应生成橙黄至棕红色的氨基化合物，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度呈正比例关系。
引伸：植物还原糖检测试剂盒是还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物。在一定范围内，还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈一定比例关系。测定棕红色物质的吸光度，该吸光度值与还原糖含量呈线性关系，利用比色法和标准曲线测得样品中的还原糖的含量。
2、铁氰化钾法
根据蔗糖的非还原性，用生成物（葡萄糖和果糖）能够还原菲林溶液中的铜，再根据生成的氧化亚铜的量求出糖的含量。先制备还原糖待测混合液，通过0.1N的硫代硫酸钠滴定，达到当量点前，注入淀粉指示剂滴定至蓝色消失。土壤的转化酶活性，以单位土重的0.1N硫代硫酸钠毫升数（对照与试验测定的差）表示。
测各种还原糖标准曲线原理:铁氰化钾[K3Fe(CN)6〕本身为黄色(吸收峰在420nm)左右，而与还原糖反应可生成无色的亚铁氰化钾[K4 Fe( CN)6 ]，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度呈反比例关系。
讨论：该法是还原糖检测的经典方法，铁氰化钾本身为黄色，与还原糖反应后生成无色的亚铁氰化钾。
3、MBTH法
测各种还原糖标准曲线原理:MBTH(3-甲基-2-苯并噻唑酮腙,3-methyl-2-benzothiazolinone hydrozone)首先与还原糖反应生成嗪，过量的MBTH被Fe+3氧化成阳离子，再与嗪反应生成青蓝色化合物，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度呈正比例关系。
讨论：该法为还原糖测定的新方法。在氧化反应过程中MBTH 失去两个电子和一个质子，形成了亲电子中间体，这一中间体被假设是具有活性的耦合化合物，中间体再与嗪反应。
总结：
比较三种方法测还原糖的精密度和回收率，MBTH法的灵敏度最高，铁氰化钾法次之，DNS法的灵敏度最低。MBTH法灵敏度高，测定不受蛋白质、醋酸盐和琥珀酸盐缓冲液的干扰，对于不同聚合度的同类还原糖，其还原端的显色吸光系数基本相同，通过实验证明，它特别适合于多糖水解酶的低酶活测定或DON酶联免疫加标测定；DNS法虽然操作稳定，精密度高，但此法灵敏度相对较低，用此法测定微量多糖水解酶，如饲料添加剂中木聚糖酶活力时，则无法准确测定；
铁氰化钾法灵敏度高于DNS法，但也存在诸多弊端，如该法为逆向显色，还原糖浓度控制稍有不当或过量，即得不到任何结果。