抗生素是指由微生物(如细菌、真菌)产生或经人工合成的一类能抑制或杀灭其他微生物的化学物质,广泛应用于人类和动物的感染性疾病治疗,以及畜禽养殖中的促生长和预防用药。然而,大部分抗生素不能被机体完全代谢,会以原形或活性代谢产物的形式随粪尿排出,继而通过有机肥施用、污水灌溉等途径大量进入土壤环境。残留在土壤中的抗生素不仅对土著微生物群落产生持续的选择压力,诱导抗性基因的产生和传播,还可能通过食物链迁移,威胁生态安全和人体健康,因此被纳入我国新污染物治理重点管控清单。
取新鲜土壤样品,称2g样品于离心管,加适量同位素内标,0.4g 乙二胺四乙酸二钠二水合物,1颗陶瓷均质子,10mL磷酸盐缓冲液和10mL 5%甲酸-乙腈溶液,涡旋振荡,离心,取上清液于另一离心管,重复提取一次,合并上清液。向合并后的上清液加10g氯化钠,剧烈振荡,离心,取适量上清液至装有无水硫酸镁+C18+PSA的净化管中(四环素类、螺旋霉素、部分大环内酯类,净化管不加PSA),振荡,离心。吸取部分上清液于浓缩管,加氨-甲醇溶液,混匀,浓缩至近干。加1mL 甲醇-甲酸水溶液复溶,过0.22µm有机滤膜,待测。
另取5~10g土壤,按HJ613测定样品干物质含量。
分别取适量标准标准溶液及内标溶液,用甲醇-甲酸水溶液定容至1mL,配制成目标物质量浓度为:1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL,内标浓度为100ng/mL系列标准溶液。
100ug/L标准样品多反应监测(SRM)质量色谱图