一、试剂
1.浓磷酸: ρ(H3PO4)= 1.7 1g/ml
2.氯化钾溶液 (KCl) =1mol/L (74.55gKCl, 1L水)
3.亚硝酸钠: 优级纯，干燥器中干燥24h。
①亚硝酸钠标准储备液: p(NO2- N) = 1000mg/ml; (4.926g 亚硝酸钠，适量水溶解，定容至1L) (存于PE瓶中，4℃，6个月)
②亚硝酸钠标准使用液1: p(NO2- N)= 100mg/ml; (10ml 储备液。定容至100ml容量瓶)
③亚硝酸钠标准使用液2: p(NO2-N)= 10mg/ml; (10ml 使用液1。定容至100ml容量瓶)
4.显色剂: ( 20ml磺胺、20ml盐酸萘基溶液、20ml 浓磷酸与100ml去离子水混合，储于棕色试剂瓶中，4℃保存， 溶液变黑时停止使用)
①磺胺溶液 (C6H8N2O2S): (1000ml容量瓶中加入600ml水，再加入200ml浓磷酸，再加入80g磺胺，定容，4℃, 1年)
②盐酸N- (1萘基) -乙二胺溶液: (0.4g 该物质溶于100ml水中。4℃保存，溶液颜色变深时停止使用)
二、主要仪器
振荡器 、离心机 、分光光度计
三、试样的制备
样品采集。
样品保存:样应该在4℃下保存和运输，在3日内分析完毕，否则应该在-20℃ (深度冷冻)下保存。
试样制备:采集后去除杂物，混匀，过18目筛，一份测定干物质质量，一份测定亚硝态氮试料制备。
四、分析步骤
4.1 试样溶液提取
称取 40g试样(空白不加试样)，放入500ml PE瓶中，加入200mlKCl （物液比1:5）， 在20C°恒稳水浴振荡器中振荡提取1h。
a)转移约60ml提取液，于100ml聚乙烯离心管中，在3000rpm的条件下分离10min。取离心后上清液50ml于100ml比色管中。（或者在4℃下， 以静置4h的方式代替离心分离，制得试料）
4.2 空白溶液制备
氯化钾溶液
4.3 标准曲线绘制
将标准使用液2稀释10倍，制得N02-N 1mg/ml标准使用液3，取7支25ml洁净比色管，分别加入标准使用液3：0,0.1,0.3，0.5,0.7,0.9，1.1ml（相当于分别含N02-N 0，0.1,0.3,0.5，0.7,0.9,1.1mg），加20ml水，加0.2ml显色剂，定容至25ml混匀，室温静置60min后于波长540nm处比色，绘制标准曲线
4.4 试样测定
取样品提取液适量，其余按标曲，于540nm处比色，记录吸光值。
五、结果计算
式中：
C — 从标曲查的样本测量液中NO2-N含量mg;
Vt — 提取液总体积ml;
Vc — 测量液体积ml;
M — 测量样本重量g;