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植物中黄酮的测定——比色法

日期: 2021-11-12
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深秋时分,银杏叶四处飘散的景象令人着迷,踏上去如行走在棉花糖上...据相关资料显示,银杏叶为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L .的干燥叶。其主要含黄酮类(flavonoids)和萜烯内酯(terpene)类化合物。据医学药理研究证实,银杏叶黄酮具有抗炎症、抗环腺苷酸乙酯酶活性、抗组胺活性等多种效用。今天,栢晖生物就给大家梳理一下如何通过比色法测定植物中黄酮的含量。

植物中黄酮的测定——比色法

一、试剂

所有试剂除注明者外,均为分析纯。

1.1 芦丁对照品、80%乙醇、30%乙醇、

1.2 0.05g/ml NaNO2:称取1.7225g亚硝酸钠定容到500ml。

1.3 0.1g/ml Al(NO3)3:称取18.7565g硝酸铝定容到500ml。

1.4 0.04g/ml NaOH溶液:称取0.8g氢氧化钠定容到500ml。

二、主要仪器

万分之一分析天平、紫外可见分光光度计

三、试样的制备

取风干的实验室待测样品充分混匀后,粉碎,籽粒全部通过 0.25mm(秸秆通过 0.5mm)孔径筛,装入样品瓶备用。

四、分析步骤

4.1 试样溶液制备

取待测样品,研细,精密称取约0.3g,用80%乙醇回流提取2次(每次用30ml)过滤,滤液合并后蒸干,用30%乙醇溶解并定容至10ml。

4.2 标准曲线绘制

标准工作曲线的绘制:精密量取芦丁对照品溶液0.0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml到10ml容量瓶中,各加入30%乙醇至1.0ml,加入0.5ml 0.05g/ml NaNO2溶液,放置6min后再加入0.3ml0.1g/ml Al(NO3)3溶液,摇匀,放置6min后加入3ml 0.04g/ml NaOH溶液,用水定容至标线,摇匀,放置15min,在510nm处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,芦丁对照品溶液的浓度为横坐标,绘制标准工作曲线。

4.3 样品的测定

精密量取样品溶液1.0ml,置于10ml容量瓶中,按照标准工作曲线绘制的方法,自加入0.5ml 0.05g/ml NaNO2溶液起依次测定吸光度,从标准工作曲线上查得样品溶液中芦丁的浓度,作为总黄酮的浓度,再计算求得总黄酮的含量。

五、结果计算

植物中黄酮的测定——比色法

式中:

C——从标准曲线查得黄酮的含量,μg/g;

N——稀释倍数;

Vt——提取液总体积,ml;

Vs——测定取液量,ml;

0.001——将μg换算为mg;

m——样品称重量。所得结果应保留小数点后三位


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