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硝态氮的检测

日期: 2021-09-01
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硝态氮的检测


硝酸盐是植物必需的矿质养分,增施氮肥是农业增产的重要措施之一,但过量施用氮肥会造成农产品品质变差、土壤污染、生态破坏等负面影响。因此,土壤硝态氮既是土壤养分评价的重要指标,又是土壤环境评价的重要指标。土壤NO3--N含量直接关系到作物产量和品质。硝态氮含量过高不仅会引起作物硝酸盐含量超标,影响农产品质量安全,危害人体健康,同时土壤NO3--N淋失和迁移,还会造成地下水和面源污染。

目前,在农业环境研究中,实验室测定土壤NO3--N含量的方法主要有流动注射分析法、紫外分光光度法和电极法。其中,流动注射分析法是近年来广泛采用的分析方法,具有分析速度快,准确度和灵敏度高等优点;离子选择性电极(ISE)是一种能对溶液中目标离子产生特异性电位响应的电化学传感器,为土壤硝态氮含量分析提供了一种快速、低成本的技术方案。


紫外分光光度法


实验仪器

100mL聚乙烯离心管若干、50ml三角瓶若干、恒温往复式振荡机、容量瓶(25ml、100ml、1000ml)、量筒、定量滤纸、分光光度计、PH计、记号笔等。

实验步骤

(1)称取约适量精确到(0.01 g)新鲜土壤样品于500 mL螺口聚乙稀瓶中,加人50 mL氯化钾(1mol/L)浸提液,旋紧瓶盖,置于恒温往复式振荡机中,(25士5)℃条件下以(220士20) r/min的频率振荡1 h。

(2)转移约60mL悬浊液于100mL聚乙烯离心管中,在3000r/min的转速下离心10min。将约50mL上清液转移至50 mL聚乙烯瓶中,待测。

(3)标准曲线:

分别吸取0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mL硝态氮标准中间液于100 mL容量瓶中,用氯化钾浸提液定容,摇匀后得到浓度分别为0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mg/L的硝态氮标准曲线工作液。

用光程长10 mm石英比色皿,于220 nm和275 nm波长处,以氯化钾浸提液为参比溶液,在紫外分光光度计上逐个测定硝态氮标准T工作液的吸光度,计算出校正吸光度并绘制标准曲线。

(4)样品测定:

用光程长10 mm石英比色皿,在220 nm和275 nm波长处,以氯化钾浸提液为参比溶液,在紫外分光光度计上测定吸光度,计算出校正吸光度,从标准曲线上查出土壞浸出液中的硝态氮含量。

结果计算:

硝态氮(mg/kg)=(C×V×D)÷M

式中:

C:标准曲线查得的NO3--N含量; 

V:浸提剂体积,ml; 

D:稀释倍数,无稀释为1;

M:土样质量,g。

讨论:实验室测定步骤有严格误差控制,而土壤样品采集和制备环节易引起测定数据误差;土样采集和运输时放置在室外或低温运输都会引起土壤硝态氮和铵态氮含量增加;土样风干、烘干保存时硝态氮和铵态氮含量增加,长时间冷藏含量也会增加,冷冻保存时含量变化最小;不同浸提剂和不同浸提时间的测定结果有差异,浸提液保存方式对测定结果有明显影响。

Key Word:测定得到接近土样采集时的田间新鲜土壤中氮含量的关键途径为:加快采样速度、样品储运、浸提等环节。




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    2024 - 09 - 20
    一、试剂药品浓盐酸,氢氧化钠,氯化钡,酚酞二、试剂配制2.1.0.05mol/l盐酸:取4.16ml浓盐酸缓缓加入1000mlUP 水中。2.2.0.1mol/l氢氧化钠:0.4g氢氧化钠用UP水定容至100ml。2.3.酚酞指示剂:称取0.5g酚酞,用95%乙醇溶解定容至100ml。2.4.11mol/l氯化钡溶液:20.82g氯化钡用UP水定容至100ml。三、洗涤方法所有新的玻璃器皿:用洗涤剂清洗干净后,再用自来水洗,再超声,再用UP水冲洗,再放入90度烘箱烘干。四、实验方法4.1 土壤预培养:称取适量土壤样品置于常温下预培养数天,使土壤恢复到常温状态。4.2 密闭培养:将恢复到常温状态的样本,称取10g置于250ml广口具塞瓶中,内置盛有10ml0.1mol/l氢氧化钠溶液的小玻璃瓶,用蒸馏水调节土壤湿度至其最大持水量的60%,5℃恒温培养7天。4.3 测定:培养结束后取出里面盛氢氧化钠的小玻璃瓶,先加入2ml氯化钡溶液,再加入2滴酚酞指示剂,再用0.05mol/l的盐酸滴定至红色消失,记录滴定体积,计算出CO2的释放量,同时做空白对照(空白用水代替)。更多检测相关讯息so栢晖生物了解~
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    2024 - 09 - 12
    1、试剂柠檬酸(AR) 柠檬酸三钠(AR) 无水甲醇(AR) 三氯甲烷(AR) 丙酮(AR) 甲苯(AR) 氢氧化钾(AR) 冰乙酸(AR) 正己烷(色谱纯) 十九烷酸甲酯(19:0)2、仪器气相色谱仪 冻干机 振荡仪 过柱装置 水浴锅 水浴氮吹仪 干式氮吹仪 高速离心机3、材料高速离心管 试管(100 mL、5 mL) 10 mL具塞试管 3 mL硅胶柱 玻璃滴管(可拆卸橡胶头)黑色塑料袋 玻璃量筒(1 mL、5 mL) 移液器(5 mL、1 mL、100 μL)4、试剂制备柠檬酸缓冲液:称取柠檬酸37.5 g,柠檬酸三钠44.1 g,溶于1 L超纯水中。提取液:依次加入柠檬酸缓冲液64 mL、无水甲醇160 mL、三氯甲烷80 mL,混合均匀。(现用现配,低温隔夜会析出盐)。甲醇甲苯混合溶液(1:1):15 mL无水甲醇、15 mL甲苯混合均匀(现用现配)。0.5 mol/L KOH溶液:称取28.05 g KOH,溶于1 L超纯水中。0.2 mol/L KOH甲醇溶液(2:3):取0.5 mol/L KOH溶液40 mL,溶入60 mL无水甲醇。1 mol/L冰乙酸溶液:取1.74 mL冰乙酸,溶入30 mL去离子水。5、样品处理土样冻干:称取土壤4.00 g(沙土8.00g)于高速离心管中,冰冻过夜,随后放入冻干机冻干。土壤含水率测定:称取土壤5.00 g于105 ℃下烘干3 h,随后冷却至室温,取出称重,计算含水率。6、测定6.1取出冻干土样,加入23ml提取液,避光振荡2h;6.2离心取上清液,重复步骤1 ,合并两个上清液;6.3依次加入三氯甲烷、柠檬酸缓冲液,避光过夜;6.4去除上清液,吹干三氯甲烷;6.5过柱;6.6吹干无水甲醇,用甲醇甲苯溶液、KOH甲醇溶液复溶,水浴,冷却至室温;6.7加入去离子水、冰乙酸...
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    2024 - 09 - 10
    一、微生物碳利用效率的概念及其环境意义微生物碳利用效率(CUE):微生物分配给生长的碳量占吸收总碳量的比率,体现了微生物合成代谢和分解代谢之间的平衡。二、微生物碳利用效率测定的原理设置18O标记处理以及加入等量自然丰度水的对照组,通过培养过后DNA中18O丰度的差值来判读加入土壤的标记水有多少进入了新产生的DNA中,由此估算微生物生长速率。测定方法——18O-H2O培养法:试样的准备:收集200g左右田间土壤样品,混匀,将其中的大约100g土壤鲜样通过2mm 孔径筛,去除石头和肉眼可见的根等杂质,装入聚乙烯样品袋备用。预培养:*土壤野外采回后迅速过2mm筛,去除土壤内石块、根系、凋落物等;*烘干法测量土壤含水量土壤;*尽快将过筛后土壤熏蒸浸提法测量微生物MBC;(1) 田间持水率的测定调整土壤含水量到60%田间持水量(WHC,water holding capacity);将土壤放入实验所需温度培养箱进行预培养,预培养时间遵照实验设计(2)预培养土样控水处理18O标记培养一个样本一个对照组,或根据样本情况挑选20%样品做对照土壤DNA的提取野外采集土壤带回实验室迅速分装冻干提取DNA,并测得DNA含量。18O丰度测定吸取DNA提取液于洁净的银囊(已称重)中并置于60℃烘箱中干燥整夜后(称重)包好,用质谱仪测定18O丰度和总氧含量。MBC测定氯仿熏蒸提取法...计算更多检测相关讯息so栢晖生物了解更多~
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    2024 - 09 - 10
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案例名称: 孵化中心
说明: 栢晖生物科技有限公司项目孵化中心成立于2015.06.01日,研发领域涉及生物试剂耗材、仪器、新产品开发及各生物科技服务类项目等。自成立以来,陆续吸引了大批专家教授加盟合作,并与全国数十家高校及知名企业建立了良好的合作关系。中心共有博士及以上学位骨干人员10人,专门负责公司新产品研发等工作,已成功研发出无线温度监控器及NO检测试剂盒等产品(详情见成功案例),另有细胞分选仪等三个项目正在积极孵化当中。
2017 - 05 - 31
案例名称: 孵化中心流程
说明:
2017 - 07 - 17
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