1、试剂
柠檬酸（AR） 柠檬酸三钠（AR） 无水甲醇（AR） 三氯甲烷（AR） 丙酮（AR） 甲苯（AR） 氢氧化钾（AR） 冰乙酸（AR） 正己烷（色谱纯） 十九烷酸甲酯（19：0）
2、仪器
气相色谱仪 冻干机 振荡仪 过柱装置 水浴锅 水浴氮吹仪 干式氮吹仪 高速离心机
3、材料
高速离心管 试管（100 mL、5 mL） 10 mL具塞试管 3 mL硅胶柱 玻璃滴管（可拆卸橡胶头）黑色塑料袋 玻璃量筒（1 mL、5 mL） 移液器（5 mL、1 mL、100 μL）
4、试剂制备
柠檬酸缓冲液：称取柠檬酸37.5 g，柠檬酸三钠44.1 g，溶于1 L超纯水中。
提取液：依次加入柠檬酸缓冲液64 mL、无水甲醇160 mL、三氯甲烷80 mL，混合均匀。（现用现配，低温隔夜会析出盐）。
甲醇甲苯混合溶液（1：1）：15 mL无水甲醇、15 mL甲苯混合均匀（现用现配）。
0.5 mol/L KOH溶液：称取28.05 g KOH，溶于1 L超纯水中。
0.2 mol/L KOH甲醇溶液（2：3）：取0.5 mol/L KOH溶液40 mL，溶入60 mL无水甲醇。
1 mol/L冰乙酸溶液：取1.74 mL冰乙酸，溶入30 mL去离子水。
5、样品处理
土样冻干：称取土壤4.00 g（沙土8.00g）于高速离心管中，冰冻过夜，随后放入冻干机冻干。
土壤含水率测定：称取土壤5.00 g于105 ℃下烘干3 h，随后冷却至室温，取出称重，计算含水率。
6、测定
6.1取出冻干土样，加入23ml提取液，避光振荡2h；
6.2离心取上清液，重复步骤1 ，合并两个上清液；
6.3依次加入三氯甲烷、柠檬酸缓冲液，避光过夜；
6.4去除上清液，吹干三氯甲烷；
6.5过柱；
6.6吹干无水甲醇，用甲醇甲苯溶液、KOH甲醇溶液复溶，水浴，冷却至室温；
6.7加入去离子水、冰乙酸溶液、正己烷，收集上清液；
6.8上清液吹干；
6.9复溶上机。
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