植物叶绿素、类胡萝卜素的测定方法

日期： 2022-04-26

标签:

一、实验原理和目的

根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比。叶绿素和类胡萝卜素在95%的乙醇提取液中的最大吸收峰波长不同，叶绿素(95%乙醇)在665nm、649nm，类胡萝卜素在470nm有最大吸收峰，根据在分光光度计下测定的吸光度，求得叶绿素及类胡萝卜素的含量。

二、实验器具和步骤

实验器具：分光光度计（UV-1800PC，上海美普达仪器有限公司）、电子天平（ES-J220，天津市德安特传感技术有限公司）、研钵、试管、小漏斗、滤纸、吸水纸、移液管、量筒、剪刀；

试剂： 95％乙醇（或80％丙酮）、石英砂、碳酸钙粉；

步骤：

1.称取剪碎的新鲜样品0.1g 左右，放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及3～5ml 95％乙醇，研成均浆，继续研磨至组织变白，静置3～5min 。

2. 取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到10ml试管中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。

3.用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入漏斗中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至10 ml ，摇匀。

4.把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95％乙醇为空白，在波长665nm、649nm、470nm下测定吸光度

计算公式：

Ca=13.95A665－6.88A649；

Cb=24.96A649－7.32A665

Cx=(1000A470-2.05Ca-114.8Cb)/245

最新资讯 MORE+
土壤碳矿化速率（呼吸速率）的测定

点击次数: 0

2024 - 09 - 20

一、试剂药品浓盐酸，氢氧化钠，氯化钡，酚酞二、试剂配制2.1.0.05mol/l盐酸：取4.16ml浓盐酸缓缓加入1000mlUP 水中。2.2.0.1mol/l氢氧化钠：0.4g氢氧化钠用UP水定容至100ml。2.3.酚酞指示剂：称取0.5g酚酞，用95%乙醇溶解定容至100ml。2.4.11mol/l氯化钡溶液：20.82g氯化钡用UP水定容至100ml。三、洗涤方法所有新的玻璃器皿：用洗涤剂清洗干净后，再用自来水洗，再超声，再用UP水冲洗，再放入90度烘箱烘干。四、实验方法4.1 土壤预培养：称取适量土壤样品置于常温下预培养数天，使土壤恢复到常温状态。4.2 密闭培养：将恢复到常温状态的样本，称取10g置于250ml广口具塞瓶中，内置盛有10ml0.1mol/l氢氧化钠溶液的小玻璃瓶，用蒸馏水调节土壤湿度至其最大持水量的60%，5℃恒温培养7天。4.3 测定：培养结束后取出里面盛氢氧化钠的小玻璃瓶，先加入2ml氯化钡溶液，再加入2滴酚酞指示剂，再用0.05mol/l的盐酸滴定至红色消失，记录滴定体积，计算出CO2的释放量，同时做空白对照(空白用水代替）。更多检测相关讯息so栢晖生物了解~
土壤磷脂脂肪酸PLFA的测定

点击次数: 0

2024 - 09 - 12

1、试剂柠檬酸（AR）柠檬酸三钠（AR）无水甲醇（AR）三氯甲烷（AR）丙酮（AR）甲苯（AR）氢氧化钾（AR）冰乙酸（AR）正己烷（色谱纯）十九烷酸甲酯（19：0）2、仪器气相色谱仪冻干机振荡仪过柱装置水浴锅水浴氮吹仪干式氮吹仪高速离心机3、材料高速离心管试管（100 mL、5 mL） 10 mL具塞试管 3 mL硅胶柱玻璃滴管（可拆卸橡胶头）黑色塑料袋玻璃量筒（1 mL、5 mL）移液器（5 mL、1 mL、100 μL）4、试剂制备柠檬酸缓冲液：称取柠檬酸37.5 g，柠檬酸三钠44.1 g，溶于1 L超纯水中。提取液：依次加入柠檬酸缓冲液64 mL、无水甲醇160 mL、三氯甲烷80 mL，混合均匀。（现用现配，低温隔夜会析出盐）。甲醇甲苯混合溶液（1：1）：15 mL无水甲醇、15 mL甲苯混合均匀（现用现配）。0.5 mol/L KOH溶液：称取28.05 g KOH，溶于1 L超纯水中。0.2 mol/L KOH甲醇溶液（2：3）：取0.5 mol/L KOH溶液40 mL，溶入60 mL无水甲醇。1 mol/L冰乙酸溶液：取1.74 mL冰乙酸，溶入30 mL去离子水。5、样品处理土样冻干：称取土壤4.00 g（沙土8.00g）于高速离心管中，冰冻过夜，随后放入冻干机冻干。土壤含水率测定：称取土壤5.00 g于105 ℃下烘干3 h，随后冷却至室温，取出称重，计算含水率。6、测定6.1取出冻干土样，加入23ml提取液，避光振荡2h；6.2离心取上清液，重复步骤1 ，合并两个上清液；6.3依次加入三氯甲烷、柠檬酸缓冲液，避光过夜；6.4去除上清液，吹干三氯甲烷；6.5过柱；6.6吹干无水甲醇，用甲醇甲苯溶液、KOH甲醇溶液复溶，水浴，冷却至室温；6.7加入去离子水、冰乙酸...
土壤微生物碳利用效率CUE实验方法介绍

点击次数: 0

2024 - 09 - 10

一、微生物碳利用效率的概念及其环境意义微生物碳利用效率（CUE）：微生物分配给生长的碳量占吸收总碳量的比率，体现了微生物合成代谢和分解代谢之间的平衡。二、微生物碳利用效率测定的原理设置18O标记处理以及加入等量自然丰度水的对照组，通过培养过后DNA中18O丰度的差值来判读加入土壤的标记水有多少进入了新产生的DNA中，由此估算微生物生长速率。测定方法——18O-H2O培养法：试样的准备：收集200g左右田间土壤样品，混匀，将其中的大约100g土壤鲜样通过2mm 孔径筛，去除石头和肉眼可见的根等杂质，装入聚乙烯样品袋备用。预培养：*土壤野外采回后迅速过2mm筛，去除土壤内石块、根系、凋落物等；*烘干法测量土壤含水量土壤；*尽快将过筛后土壤熏蒸浸提法测量微生物MBC；（1）田间持水率的测定调整土壤含水量到60%田间持水量（WHC，water holding capacity）；将土壤放入实验所需温度培养箱进行预培养，预培养时间遵照实验设计（2）预培养土样控水处理18O标记培养一个样本一个对照组，或根据样本情况挑选20%样品做对照土壤DNA的提取野外采集土壤带回实验室迅速分装冻干提取DNA，并测得DNA含量。18O丰度测定吸取DNA提取液于洁净的银囊（已称重）中并置于60℃烘箱中干燥整夜后（称重）包好，用质谱仪测定18O丰度和总氧含量。MBC测定氯仿熏蒸提取法...计算更多检测相关讯息so栢晖生物了解更多~
低价、高质、好礼！给你一个不一样的开学季~

点击次数: 0

2024 - 09 - 10

文体活动 MORE+

案例名称：孵化中心

说明：栢晖生物科技有限公司项目孵化中心成立于2015.06.01日，研发领域涉及生物试剂耗材、仪器、新产品开发及各生物科技服务类项目等。自成立以来，陆续吸引了大批专家教授加盟合作，并与全国数十家高校及知名企业建立了良好的合作关系。中心共有博士及以上学位骨干人员10人，专门负责公司新产品研发等工作，已成功研发出无线温度监控器及NO检测试剂盒等产品（详情见成功案例），另有细胞分选仪等三个项目正在积极孵化当中。

2017 - 05 - 31

案例名称：孵化中心流程

说明：

2017 - 07 - 17

植物叶绿素、类胡萝卜素的测定方法

一、 实验原理和目的

二、 实验器具和步骤

一、实验原理和目的

二、实验器具和步骤