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水果、蔬菜及其制品中叶绿素含量的测定——分光光度法

日期: 2021-08-20
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1、范围:

本标准规定了分光光度法测定水果、蔬菜及其制品中叶绿素含量的方法。

本标准适用于水果、蔬菜及其制品中叶绿素a含量、叶绿素b含量和叶绿素总含量的测定。

本标准方法中叶绿素a的线性范围为0.004 mg/g ~0.018 mg/ g,叶绿素b的线性范围为0.005mg/g~0.020mg/g。


2、原理:

试样中的叶绿素用无水乙醇和丙酮1:1(V :V)混合液提取,试液分别测定645nm和663 nm处吸光度值,利用Arnon公式计算试样叶绿素含量。


3、试剂

除非另有说明,所用水为(GB/T 6682  分析实验室用水规格和试验方法)中规定的三级水及以上,试剂均为分析纯试剂。

3.1无水乙醇。

3.2 丙酮。

3.3提取剂:无水乙醇和丙酮1:1(V:V)混合液。


4、仪器

4.1 分光光度计。

4.2分析天平(±0.01g)。

4.3高速组织捣碎机:0 r/ min~2 000r/ min。


5、分析步骤

5.1

试样制备


5.1.1含水量较多的样品

取代表性样品,切碎,混匀,用组织捣碎机制成匀浆,备用。

5.1.2 含水量较少的制品

取代表性样品,按1:1(m : m)的比例加入蒸馏水,用组织捣碎机制成匀浆,备用。

5.2 

试液制备

深绿色样品、准确称取0.5g试样于三角瓶中,加人100 mL提取剂。绿色样品,准确称取0.5g试样于三角瓶中,加入10mL提取剂。浅绿色样品,称取2.0g~5.0g试样于三角瓶中,加入10mL提取剂。三角瓶用封口膜密封,室温下避光静置提取5 h,过滤,滤液待测。

注意:光照和高温会使叶绿素发生氧化和分解,试液制备时应避免高温和光照。

5.3

试液的测定

以提取剂为空白溶液,凋零点。分别在645nm和663nm处测定试液的吸光度值。



6、结果计算

试样中叶绿素a含量、叶绿素b含量和叶绿素总含量均以质量分数w表示,单位为毫克每克(mg/g),分别按式(1)、式(2)和式(3)计算。

W1=(12.72×A1-2.59×A2)×v/(1000×m).........(1)

式中:

W1------叶绿素a含量,单位为毫克每克(mg/g);

A1------试液在663nm处的吸光值;

A2------试液在645nm处的吸光值;

v------试液体积,单位为毫升(mL);

m------试液质量,单位为克(g)。

计算结果保留3位有效数字。

W2=(22.88×A2-4.67×A1)×v/(1000×m)..........(2)

式中:

W2------叶绿素b含量,单位为毫克每克(mg/g)

计算结果保留3位有效数字。

W3=(8.05×A1+20.29×A2)×v/(1000×m)........(3) 

W3------叶绿素总含量,单位为毫克每克(mg/g)

计算结果保留3位有效数字。


7、精密度

在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不大于这2个测定值算术平均值的10%。

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    2025 - 07 - 15
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